J Clin Invest：揭示USP9X去泛素化ALDH1A3并确保GCSs的间充质特性

结缔组织母细胞核瘤（GBM）是最常见于和破坏持续性的人脑恶持续性，其特性在于广泛的内异质持续性。尽管最近在多模式疗程各个方面取得了重大突破，但GBM患者的结果仍然令人沮丧。GBM具备一个细胞核亚群，称为GBM造血核（GSCs），较强自我更换活持续性和多向分化潜能以及起始意志力。因此，迫切需要探索针对GSC的新疗程手段。并且，缩合脱氢酶（ALDH）核亚基包含19种酶，它们将内源和其会缩合代谢并成反之亦然的缩合。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，参与人体细胞核的各种荷尔蒙过程。越来越多的确凿证据得出结论，ALDH1A3在帕金森氏症造血核（CSCs）中所表现出高活持续性，并影响这些细胞核内的各种生物学特性。在GBM中所，已找到ALDH1A3作为确保时有充质（MES）GSC的自我更换和致瘤持续性的更为重要原子。然而，MES GSCs中所ALDH1A3失调的必要仍然是神秘的。2019年4月8日，南京医科大学第一医科王慧博团队等人在The Journal of Clinical Investigation上登载题为“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的篇名，找到USP9X是一种确实的DUB，可可调ALDH1A3多色氨酸化和稳定化。并且，USP9X是预测ALDH1A3hi MES GSCs石英砂的更为重要原子，是MES GSCs自我更换和致瘤持续性所前提的。同时还评估了USP9X抑制对患者；也的MES GSC外星人复刻模型的潜在治果。为了确定ALDH1A3亚基是否被色氨酸 - 亚基酶体的系统（UPS）翻译后控制，研究者执法人员首先可用放线菌酮（CHX）绕过亚基质从头合并成并HEK293T细胞核和正常人五角形结缔组织细胞核（NHAs）中所的ALDH1A3亚基质水平。实际上，ALDH1A3在CHX处理的8两星期内慢慢地甲醛并几乎检测足足。此外，用亚基酶体抑制剂MG-132处理细胞核致使ALDH1A3亚基水平引人注意增加。这些样本得出结论ALDH1A3通过UPS甲醛。接下来，研究者执法人员促并成深入研究负责ALDH1A3稳定化的潜在DUB，并可用抑制剂HEK293T细胞核中所的98DUB的siGENOMERTF文库进行RNAi配对。该研究者初始配对深入研究了与ALDH1A3隐含涉及的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293细胞核中所的ALDH1A3共隐含时，找到只有USP9X必需与人体内ALDH1A3直接化学键，从而暗示USP9X是控制ALDH1A3稳定持续性的引人注意候选物。为了测试者这一点，将Flag标记的WT USP9X或裂解失活的互补C1566A USP9X（在裂解结构域的一个更为重要赖氨酸中所可携带点突变）转染到HEK293T细胞核中所。 WT USP9X而非C1566A互补的隐含以施打依赖持续性模式增加ALDH1A3亚基水平，得出结论USP9X以依赖于其DUB活持续性的模式可调ALDH1A3。结缔组织母细胞核瘤（GBM）造血核（GSC）的时有充质（MES）冠状病毒代表癌细胞核亚群，其因其离地波及持续性和对这两项疗法的抗持续性而闻名。最近已提出缩合脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为确保GSC的MES特性的更为重要决定因素。然而，支持异常ALDH1A3隐含的必要仍然引人注意。在该研究者中所，研究者执法人员找到色氨酸特异持续性亚基酶9X（USP9X）是MES GSC中所ALDH1A3的确实去色氨酸化酶。 USP9X与ALDH1A3化学键，纤维亚基并稳定化。此外，研究者结果辨识FACS分选的USP9Xhi细胞核石英砂较强高ALDH1A3活持续性和有效致瘤意志力的MES GSC。USP9X的消耗引人注意下调ALDH1A3，致使MES GSC的自我更换和致瘤意志力的丧失，这可以通过ALDH1A3的病变隐含得到太大程度的挽救。此外，研究者执法人员还证明USP9X抑制剂WP1130其会ALDH1A3甲醛并且在MES GSC共通的原位外星人复刻模型中所辨识出引人注意的疗程解毒。另外，USP9X与原发持续性人GBM电子束中所的ALDH1A3隐含强烈涉及，并且对于较强MES亚组的患者较强HRS价值。总的来说，研究者结果概述了USP9X作为ALDH1A3亚基稳定化的更为重要去色氨酸化酶和GSC定向疗程的潜在靶点。原始出处：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019